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伯樂熒光定量pcr儀cfx96特點(diǎn)

發(fā)布時(shí)間:2025/6/5點(diǎn)擊次數(shù):19

伯樂 CFX96 熒光定量 PCR 儀詳盡介紹

一、產(chǎn)品概述

CFX96 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀是由 Bio-Rad(伯樂公司)推出的基因擴(kuò)增與定量分析設(shè)備,屬于CFX系列產(chǎn)品之一。該設(shè)備結(jié)合了高精度溫控系統(tǒng)與多通道光學(xué)檢測模塊,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、臨床輔助診斷、食品安全檢測、環(huán)境監(jiān)測及農(nóng)業(yè)遺傳分析等領(lǐng)域。

CFX96 是該系列中的標(biāo)準(zhǔn)96孔通量型號(hào),其設(shè)計(jì)強(qiáng)調(diào)樣品間一致性、數(shù)據(jù)分析靈活性以及操作流程的便利性,適用于高重復(fù)性和中高通量需求的實(shí)驗(yàn)場景。


二、熒光定量PCR技術(shù)原理

熒光定量PCR(Real-Time Quantitative PCR,qPCR)技術(shù)是基于傳統(tǒng)PCR技術(shù)發(fā)展起來的一種實(shí)時(shí)檢測擴(kuò)增產(chǎn)物的方法,利用熒光信號(hào)變化來監(jiān)控PCR反應(yīng)進(jìn)程。其基本流程包括:

  1. DNA模板擴(kuò)增:通過熱循環(huán)進(jìn)行DNA的指數(shù)擴(kuò)增;

  2. 熒光信號(hào)采集:在每一循環(huán)末端采集熒光信號(hào),與目標(biāo)擴(kuò)增產(chǎn)物濃度相關(guān);

  3. 數(shù)據(jù)分析:通過Ct值(循環(huán)閾值)與標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算初始模板數(shù)量;

  4. 結(jié)果展示:軟件可輸出熔解曲線、擴(kuò)增曲線、相對(duì)表達(dá)量分析等數(shù)據(jù)圖譜。

CFX96 將熒光檢測與溫控系統(tǒng)緊密結(jié)合,使用戶能夠?qū)崟r(shí)掌握擴(kuò)增反應(yīng)的全過程。


三、CFX96 主要技術(shù)參數(shù)

參數(shù)類別技術(shù)指標(biāo)
通量96孔標(biāo)準(zhǔn)PCR板
每孔反應(yīng)體積10–50 μL
溫控范圍30–100°C
升溫/降溫速率最大5.0°C/s
溫控精度±0.2°C(孔間差異<±0.4°C)
熒光通道標(biāo)準(zhǔn)配備5通道(FAM, HEX/VIC, ROX, Cy5, Quasar 705)
光源固態(tài)LED
檢測器光電二極管陣列
數(shù)據(jù)輸出.xls, .csv, .pdf等格式
軟件功能多重定量分析、基因分型、熔解曲線分析、相對(duì)/絕對(duì)定量等
接口USB、以太網(wǎng)口,可遠(yuǎn)程控制與數(shù)據(jù)傳輸

四、儀器結(jié)構(gòu)與核心組件

1. 熱循環(huán)系統(tǒng)

CFX96 采用高性能Peltier熱電加熱器,結(jié)合96孔鋁質(zhì)加熱模塊,提供快速且均一的溫度變化,確保所有孔位的擴(kuò)增條件一致。

2. 光學(xué)檢測系統(tǒng)

CFX96 配備多通道熒光檢測系統(tǒng),通過頂部濾光系統(tǒng)進(jìn)行熒光激發(fā)與信號(hào)采集。每個(gè)通道配置獨(dú)立LED光源與檢測濾片,可避免信號(hào)串?dāng)_,實(shí)現(xiàn)多重靶標(biāo)同步檢測。

3. 軟件平臺(tái)(CFX Manager)

用戶可通過CFX Manager軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、運(yùn)行監(jiān)控、數(shù)據(jù)分析及報(bào)告導(dǎo)出。軟件支持自動(dòng)建模、標(biāo)準(zhǔn)曲線生成、表達(dá)量歸一化和基因分型分析等。


五、應(yīng)用領(lǐng)域

CFX96 適用于以下研究與檢測領(lǐng)域:

1. 分子生物學(xué)研究

  • 基因表達(dá)分析(qRT-PCR)

  • miRNA定量

  • 轉(zhuǎn)錄因子活性監(jiān)測

2. 臨床檢測研究

  • 病原體核酸定量

  • 腫瘤標(biāo)志物分析

  • 藥物代謝基因檢測

3. 食品安全與農(nóng)業(yè)

  • 轉(zhuǎn)基因成分定量檢測

  • 食源性致病菌篩查

  • 作物基因多態(tài)性研究

4. 環(huán)境微生物分析

  • 水質(zhì)與土壤中微生物DNA定量

  • 環(huán)境抗性基因檢測


六、使用維護(hù)建議

為確保CFX96設(shè)備長期運(yùn)行穩(wěn)定,用戶需關(guān)注以下事項(xiàng):

日常維護(hù)

  • 使用前檢查熱蓋與光學(xué)組件,避免灰塵污染;

  • 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后清理樣本殘液,保持孔板區(qū)域干燥;

  • 定期校準(zhǔn)光學(xué)系統(tǒng)與溫控模塊。

軟件管理

  • 保持CFX Manager軟件更新至最新穩(wěn)定版本;

  • 定期備份實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及分析報(bào)告;

  • 正確設(shè)定用戶權(quán)限,避免誤操作。

操作規(guī)范

  • 孔板與密封膜選擇需與儀器兼容;

  • 控溫前進(jìn)行熱蓋預(yù)熱,防止冷凝;

  • 熒光通道設(shè)定避免染料重疊,以免影響分析結(jié)果。


七、CFX96 與其他型號(hào)對(duì)比

項(xiàng)目CFX96CFX384ABI QuantStudio 5Roche LightCycler 480
孔數(shù)9638496/384(型號(hào)不同)96/384
光學(xué)通道554/56
軟件界面圖形化、模塊化同CFX96依型號(hào)變化專業(yè)功能豐富
優(yōu)勢(shì)溫控一致性好,數(shù)據(jù)輸出靈活高通量系統(tǒng)整合度高多重檢測能力強(qiáng)

八、二手CFX96選購參考建議

由于CFX96耐用性良好,部分實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)讓設(shè)備時(shí)狀態(tài)仍較理想。選擇二手設(shè)備時(shí)可從以下方面評(píng)估:

1. 設(shè)備狀況

  • 樣品孔板是否磨損;

  • 熱蓋開啟是否順暢;

  • 各通道熒光強(qiáng)度是否均一;

  • 檢查系統(tǒng)運(yùn)行是否有報(bào)錯(cuò)提示。

2. 檢測報(bào)告

要求賣家提供:

  • 溫控一致性報(bào)告;

  • 熒光校準(zhǔn)數(shù)據(jù);

  • 模擬實(shí)驗(yàn)Ct值穩(wěn)定性測試。

3. 軟件與許可證

  • 確認(rèn)CFX Manager是否可正常安裝與授權(quán);

  • 如為舊版本,可聯(lián)系Bio-Rad代理了解兼容性問題。

4. 技術(shù)支持

  • 優(yōu)先選擇提供短期質(zhì)保與培訓(xùn)服務(wù)的渠道;

  • 了解是否可購買耗材(如原裝密封膜、孔板);

  • 確認(rèn)是否兼容現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)室PC環(huán)境。


九、常見問題與解答

Q1:是否可用于多重?zé)晒馓结樂治觯?/strong>
A:可支持5色通道并行檢測,適合常規(guī)TaqMan探針、SYBR Green以及其他染料組合的多重反應(yīng)。

Q2:CFX96是否可進(jìn)行熔解曲線分析?
A:支持熔解曲線檢測,適用于SNP分型、特異性驗(yàn)證等應(yīng)用。

Q3:是否支持遠(yuǎn)程控制?
A:具備網(wǎng)絡(luò)連接功能,通過以太網(wǎng)或局域網(wǎng)可實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程監(jiān)控、數(shù)據(jù)傳輸與操作。


十、結(jié)語

伯樂 CFX96 熒光定量PCR儀作為實(shí)驗(yàn)室常用的實(shí)時(shí)擴(kuò)增平臺(tái)之一,憑借穩(wěn)定的溫控系統(tǒng)、多色熒光通道、友好的用戶界面,在科研與檢測領(lǐng)域均有廣泛應(yīng)用。對(duì)于二手市場的設(shè)備,在合理評(píng)估和維護(hù)的前提下,依然可以發(fā)揮可靠性能,滿足多樣化的實(shí)驗(yàn)需求。


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