賽默飛CO?培養(yǎng)箱滅菌程序詳解

一、引言

CO?培養(yǎng)箱是現(xiàn)代生命科學(xué)研究中關(guān)鍵的實(shí)驗(yàn)設(shè)備，主要用于細(xì)胞、組織以及微生物的體外培養(yǎng)。為了保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性與樣品的生物安全，控制污染是使用過程中必須面對(duì)的重要問題。污染可能來源于空氣顆粒、水盤、操作失誤、培養(yǎng)容器滲漏或前一次實(shí)驗(yàn)殘留的微生物。

為應(yīng)對(duì)這些潛在風(fēng)險(xiǎn)，許多CO?培養(yǎng)箱廠商在產(chǎn)品中內(nèi)置自動(dòng)滅菌程序，賽默飛（Thermo Fisher Scientific）作為行業(yè)內(nèi)的重要廠商，其多款培養(yǎng)箱型號(hào)均集成了高溫自動(dòng)滅菌功能，便于用戶定期對(duì)箱體內(nèi)部環(huán)境進(jìn)行滅菌消毒。

本文將詳細(xì)介紹賽默飛培養(yǎng)箱中典型的滅菌程序，主要以Heracell VIOS系列和Forma Steri-Cycle系列為代表，說明其工作機(jī)制、執(zhí)行流程、安全注意事項(xiàng)與維護(hù)要點(diǎn)。

二、滅菌方式分類

賽默飛培養(yǎng)箱常見的滅菌方式包括以下幾種：

1. 高溫濕熱滅菌（自動(dòng)）

多數(shù)中賽默飛培養(yǎng)箱（如Heracell VIOS、Steri-Cycle）內(nèi)置高溫濕熱滅菌程序，可將內(nèi)腔溫度提升至180°C或140°C并保持一定時(shí)間（通常為6~12小時(shí)），以達(dá)到滅菌效果。

該方式模擬實(shí)驗(yàn)室高壓滅菌鍋中的濕熱滅菌原理，適合殺滅細(xì)菌、真菌、芽孢等常見污染源。

2. 紫外線殺菌（部分型號(hào)）

個(gè)別型號(hào)（如早期Heracell 150i）配備UV紫外殺菌燈，用于水盤或空氣通道中短時(shí)間滅菌。該方式成本較低，但滅菌范圍有限，主要適用于抑制微生物滋生，而非清除污染。

3. 手動(dòng)化學(xué)滅菌（非自動(dòng)程序）

對(duì)于無自動(dòng)滅菌功能的培養(yǎng)箱，如Thermo 311、160i等，需用戶使用酒精、次氯酸鈉、過氧化氫蒸汽等消毒劑對(duì)內(nèi)腔進(jìn)行擦拭和噴灑，殺滅殘留微生物。這種方式操作簡(jiǎn)便，但對(duì)操作規(guī)范和人員經(jīng)驗(yàn)有一定依賴。

三、高溫自動(dòng)滅菌程序詳解（以Heracell VIOS為例）

1. 滅菌機(jī)制

Heracell VIOS系列培養(yǎng)箱采用高溫空氣對(duì)流滅菌技術(shù)，程序設(shè)定為在180°C ±5°C條件下連續(xù)運(yùn)行6小時(shí)，滅菌期間系統(tǒng)將自動(dòng)關(guān)閉所有傳感器與氣體供應(yīng)，由程序接管控制。

滅菌對(duì)象包括：

• 內(nèi)膽結(jié)構(gòu)

• 擱板、支架

• 門封膠條（耐高溫硅膠材質(zhì)）

• HEPA空氣過濾模塊（耐熱結(jié)構(gòu)）

• 風(fēng)扇系統(tǒng)（高溫兼容）

此類滅菌程序已通過驗(yàn)證，滿足實(shí)驗(yàn)室微生物清除標(biāo)準(zhǔn)（如EN 285、ISO 17665）。

2. 程序啟動(dòng)條件

• 內(nèi)部清空：所有培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、液體容器必須移出。

• 附件拆卸：如CO?檢測(cè)管、外接探頭等敏感配件需斷開或保護(hù)。

• 門封檢查：檢查門封是否貼合，防止高溫泄漏。

• 電源穩(wěn)定：滅菌程序全程需穩(wěn)定供電，不可中斷。

3. 操作步驟

以下以Heracell VIOS 160i為例：

1. 進(jìn)入系統(tǒng)設(shè)置

• 從主菜單選擇“Sterilization"功能。

• 系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)檢查當(dāng)前狀態(tài)是否符合滅菌要求（溫度、門狀態(tài)、內(nèi)部負(fù)載等）。

2. 確認(rèn)操作

• 屏幕提示確認(rèn)是否開始滅菌。

• 用戶需輸入管理員密碼（如已設(shè)定），確認(rèn)執(zhí)行操作。

3. 滅菌過程

• 升溫階段（1.5小時(shí)）：溫度逐步提升至180°C。

• 保溫階段（6小時(shí)）：維持180°C恒溫滅菌。

• 冷卻階段（3小時(shí)以上）：系統(tǒng)自動(dòng)降低至安全開啟溫度。

4. 結(jié)束提示

• 滅菌完成后，設(shè)備提示“Cycle Complete"。

• 系統(tǒng)記錄本次滅菌日志，可通過屏幕或數(shù)據(jù)接口導(dǎo)出。

5. 重新配置

• 恢復(fù)CO?連接。

• 安裝內(nèi)部附件。

• 運(yùn)行空載測(cè)試，確認(rèn)溫度與氣體控制功能恢復(fù)正常。

4. 滅菌周期建議

• 常規(guī)實(shí)驗(yàn)室使用：每1-2個(gè)月執(zhí)行一次。

• 出現(xiàn)污染事件后：立即執(zhí)行1次滅菌。

• 長(zhǎng)時(shí)間停機(jī)后重新使用前：建議先運(yùn)行1次滅菌。

四、安全注意事項(xiàng)

高溫自動(dòng)滅菌雖操作便利，但仍需注意以下幾點(diǎn)：

1. 避免人員接觸設(shè)備表面

滅菌運(yùn)行期間設(shè)備外殼溫度可能升高，操作人員應(yīng)遠(yuǎn)離，避免燙傷。

2. 嚴(yán)禁夾帶液體或塑料器皿滅菌

非耐熱器具在高溫下可能融化或爆裂，導(dǎo)致污染或設(shè)備損壞。

3. 滅菌完成前不得強(qiáng)行斷電或開門

中途干預(yù)可能導(dǎo)致滅菌失敗、系統(tǒng)損壞或熱氣泄露傷人。

4. 不得高頻率運(yùn)行滅菌程序

連續(xù)滅菌會(huì)加速電子元件老化，建議間隔至少兩周以上。

五、常見問題與解決建議

六、無自動(dòng)滅菌功能型號(hào)的消毒建議

如Thermo 311、160i等型號(hào)無內(nèi)置滅菌程序，可參考以下人工滅菌流程：

1. 物理清潔

• 用70%乙醇擦拭腔體、擱架、門封等部位。

• 清洗水盤并高溫高壓滅菌（或使用消毒液浸泡）。

2. 化學(xué)消毒

• 使用0.5%-1%次氯酸鈉溶液擦拭后靜置15分鐘，再用清水擦干。

• 使用3%過氧化氫噴灑后關(guān)閉門30分鐘。

3. 紫外輔助

• 如有條件，可用便攜式UV燈對(duì)內(nèi)腔照射15分鐘以上。

七、維護(hù)與記錄建議

為了保持培養(yǎng)箱在長(zhǎng)期運(yùn)行中的潔凈性與穩(wěn)定性，推薦建立滅菌與維護(hù)記錄：

• 建議張貼“滅菌記錄表"于設(shè)備側(cè)面或?qū)嶒?yàn)記錄本中。

• 若用于臨床或GMP要求環(huán)境，應(yīng)配合SOP文檔執(zhí)行。

八、總結(jié)

賽默飛培養(yǎng)箱配備的自動(dòng)高溫滅菌程序是提升實(shí)驗(yàn)潔凈度、降低污染風(fēng)險(xiǎn)的重要工具。通過高溫對(duì)整腔系統(tǒng)進(jìn)行定期殺菌，可減少微生物殘留，提高培養(yǎng)環(huán)境的可控性，尤其適合對(duì)細(xì)胞活性要求較高的科研項(xiàng)目。操作過程中需嚴(yán)格遵守程序與安全指引，避免誤操作帶來的設(shè)備損壞與人身傷害。

對(duì)于不具備自動(dòng)滅菌功能的機(jī)型，也可通過科學(xué)的化學(xué)消毒手段結(jié)合日常維護(hù)，維持培養(yǎng)箱的清潔狀態(tài)。